Il-kromatografija, magħrufa wkoll bħala "analiżi kromatografika", "kromatografija", hija metodu ta 'separazzjoni u analiżi, li għandha firxa wiesgħa ħafna ta' applikazzjonijiet fil-kimika analitika, kimika organika, bijokimika u oqsma oħra.
Il-fundatur tal-kromatografija huwa botaniku Russu M.Tsvetter.Fl-1906, il-botanika Russu Zvetter ippubblika r-riżultati tal-esperiment tiegħu: Sabiex jissepara l-pigmenti tal-pjanti, ferra estratt tal-etere tal-pitrolju li fih pigmenti tal-pjanti f'tubu tal-ħġieġ li fih trab tal-karbonat tal-kalċju u eluħih bl-etere tal-pitrolju minn fuq għal isfel.Minħabba li pigmenti differenti għandhom kapaċitajiet ta 'assorbiment differenti fuq il-wiċċ tal-partiċelli tal-karbonat tal-kalċju, bil-proċess ta' lissija, pigmenti differenti jimxu 'l isfel b'veloċitajiet differenti, u b'hekk jiffurmaw meded ta' kuluri differenti.Il-komponenti tal-pigment ġew separati.Huwa semmiet dan il-metodu ta 'separazzjoni kromatografija.
Rappreżentazzjoni skematika ta 'esperiment ta' separazzjoni tal-pigment tal-weraq tal-pjanti
Bl-iżvilupp kontinwu ta 'metodi ta' separazzjoni, aktar u aktar sustanzi bla kulur isiru l-oġġett ta 'separazzjoni, il-kromatografija wkoll tilfet gradwalment it-tifsira ta' "kulur", iżda l-isem għadu jintuża llum.
Klassifikazzjoni kromatografika
L-essenza tal-kromatografija hija proċess li fih il-molekuli li għandhom jiġu separati huma maqsuma u bilanċjati bejn il-fażi stazzjonarja u l-fażi mobbli.Sustanzi differenti huma maqsuma b'mod differenti bejn iż-żewġ fażijiet, li jagħmilhom jiċċaqilqu b'veloċitajiet differenti mal-fażi mobbli.Bil-moviment tal-fażi mobbli, komponenti differenti fit-taħlita huma separati minn xulxin fuq il-fażi stazzjonarja.Skont il-mekkaniżmu, jista 'jinqasam f'varjetà ta' kategoriji.
1, skont il-klassifikazzjoni tal-istat fiżiku b'żewġ fażijiet
Fażi mobbli: Kromatografija tal-gass, kromatografija likwida, kromatografija ta 'fluwidu superkritiku
Fażi stazzjonarja: gass-solidu, gass-likwidu;Likwidu-solidu, likwidu-likwidu
2, skond il-forma ta 'klassifikazzjoni tal-fażi stazzjonarja
Kromatografija tal-kolonna: kromatografija tal-kolonna ippakkjata, kromatografija tal-kolonna kapillari, kromatografija tal-kolonna micropacked, kromatografija preparattiva
Kromatografija tal-pjan: kromatografija tal-karta, kromatografija ta' saff irqiq, kromatografija tal-membrana tal-polimeru
3, ikklassifikati skond il-mekkaniżmu ta ' separazzjoni
Kromatografija ta 'assorbiment: Komponenti differenti huma separati skond il-kapaċitajiet ta' adsorbiment u desorbiment tagħhom fuq assorbenti
Kromatografija tal-qsim: Il-komponenti differenti huma separati skont is-solubilità tagħhom fis-solvent
Kromatografija ta 'esklużjoni molekulari: skond id-daqs tad-daqs molekulari tas-separazzjoni ln kromatografija ta' skambju ta 'joni: komponenti differenti ta' l-affinità għas-separazzjoni tar-reżina ta 'skambju ta' joni
Kromatografija ta' affinità: Separazzjoni bl-użu ta' affinità speċifika bejn makromolekuli bijoloġiċi
Elettroforeżi kapillari: il-komponenti ġew separati skont id-differenzi fil-mobilità u/jew l-imġiba tal-partizzjoni
Il-kromatografija chiral tintuża għas-separazzjoni u l-analiżi ta 'drogi kirali, li jistgħu jinqasmu fi tliet kategoriji: metodu ta' reaġent ta 'derivazzjoni chiral;Metodu addittiv tal-fażi mobbli chiral;Metodu ta' riżoluzzjoni tal-fażi stazzjonarja chiral
Terminoloġija bażika għall-kromatografija
Il-kurvi miksuba bit-tpinġija tas-sinjali tar-rispons tal-komponenti wara l-iskoperta tas-separazzjoni kromatografika kontra l-ħin jissejħu kromatogrammi.
Linja bażi:Taħt ċerti kundizzjonijiet kromatografiċi, il-kurva tas-sinjal iġġenerat meta l-fażi mobbli biss tgħaddi mis-sistema tad-ditekter tissejjaħ il-linja bażi, kif muri fil-linja ot.Meta l-kundizzjoni sperimentali kienet stabbli, il-linja bażi kienet linja parallela mal-assi orizzontali.Il-linja bażi tirrifletti l-istorbju tal-istrument, prinċipalment id-ditekter, maż-żmien.
Għoli tal-quċċata:id-distanza vertikali bejn il-punt tal-quċċata kromatografiku u l-linja bażi, indikata b'h, kif muri fil-linja AB '.
Wisa' tar-reġjun:Il-wisa ' tar-reġjun tal-quċċata kromatografika hija direttament relatata mal-effiċjenza tas-separazzjoni.Hemm tliet metodi biex jiddeskrivu l-ogħla wisa 'kromatografiku: devjazzjoni standard σ, wisa' massimu W, u FWHM W1/2.
Devjazzjoni standard (σ):σ hija n-nofs distanza bejn iż-żewġ punti ta 'inflessjoni fuq il-kurva tad-distribuzzjoni normali, u l-valur ta' σ jindika l-grad ta 'dispersjoni tal-komponenti 'l bogħod mill-kolonna.Iktar ma jkun kbir il-valur ta 'σ, aktar il-komponenti tal-effluwent imxerrda, u l-agħar l-effett tas-separazzjoni.Bil-maqlub, il-komponenti tal-effluwent huma kkonċentrati u l-effett tas-separazzjoni huwa tajjeb.
L-ogħla wisa' W:Il-punti ta 'intersezzjoni fuq iż-żewġ naħat tal-quċċata kromatografika jintużaw bħala linji tanġenti, u l-interċettazzjoni fuq il-linja bażi tissejjaħ wisa' tal-quċċata, jew wisa 'tal-linja bażi, li tista' wkoll tiġi espressa bħala W, kif muri fil-Figura IJ.Skont il-prinċipju ta 'distribuzzjoni normali, ir-relazzjoni bejn il-wisa' tal-quċċata u d-devjazzjoni standard tista 'tiġi ppruvata li hija W=4σ.
W1/2:Il-wisa 'tal-quċċata f'nofs l-għoli tal-quċċata tissejjaħ FWHM, kif muri għad-distanza ta' GH.W1/2=2.355σ, W=1.699W1/2.
W1/2, W huma t-tnejn derivati minn σ u huma wżati biex jikkalkulaw iż-żoni tal-ogħla livell minbarra l-kejl tal-effett tal-kolonna.Il-kejl FWHM huwa aktar konvenjenti u l-aktar użat komunement.
sommarju qasir
Mill-kurva tal-ħruġ tal-ogħla livell kromatografiku, jistgħu jinkisbu l-għanijiet li ġejjin:
a, Twettqet analiżi kwalitattiva bbażata fuq il-valur taż-żamma tal-qċaċet kromatografiċi
b, analiżi kwantitattiva bbażata fuq iż-żona jew il-quċċata tal-quċċata kromatografika
C. L-effiċjenza tas-separazzjoni tal-kolonna ġiet evalwata skont il-valur ta 'ritenzjoni u l-wisa' tal-quċċata tal-quċċata kromatografika
Il-formula tal-kalkolu involuta fil-kromatografija
1. Valur ta 'żamma
Il-valur ta' ritenzjoni huwa parametru użat biex jiddeskrivi l-grad li fih komponent tal-kampjun jinżamm fil-kolonna u jintuża bħala indikatur tal-karatterizzazzjoni kromatografika.Il-metodu ta 'rappreżentazzjoni tiegħu huwa kif ġej:
Ħin ta' żamma tR
Ħin tal-mewttM
Aġġusta l-ħin ta' żamma tR'=tR-tM
(Ħin totali mgħoddi fil-fażi wieqfa)
Volum ta' żamma
VR=tR*F. (indipendenti mill-veloċità tal-fażi mobbli)
Volum mejjet
VM=tM*Fc
(L-ispazju mhux okkupat mill-fażi stazzjonarja fil-mogħdija tal-fluss mill-injettur għad-ditekter)
Aġġusta l-volum ta 'żamma VR'=t'R*Fc
2. Valur relattiv taż-żamma
Valur ta 'ritenzjoni relattiv, magħruf ukoll bħala fattur ta' separazzjoni, proporzjon ta 'koeffiċjent ta' partizzjoni jew fattur ta 'kapaċità relattiva, huwa l-proporzjon tal-ħin ta' żamma aġġustat (volum) tal-komponent ittestjat mal-ħin ta 'żamma aġġustat (volum) tal-istandard taħt ċerti kundizzjonijiet kromatografiċi.
Intużaw valuri relattivi ta 'żamma biex tiġi eliminata l-influwenza ta' ċerti kundizzjonijiet operattivi, bħar-rata tal-fluss u t-telf ta 'fissattiv, fuq il-valuri ta' żamma.L-istandard fil-valur relattiv taż-żamma jista 'jkun komponent fil-kampjun ittestjat jew kompost miżjud artifiċjalment.
3. Indiċi ta 'żamma
L-indiċi ta' ritenzjoni huwa l-indiċi ta' ritenzjoni tas-sustanza i li għandha tiġi ttestjata f'soluzzjoni fissa X. Jingħażlu żewġ n-alanes bħala sustanzi ta' referenza, li waħda minnhom għandha N numru tal-karbonju u l-oħra għandha N+n.Il-ħin ta' ritenzjoni aġġustat tagħhom huwa t 'r (N) u t 'r (N+n), rispettivament, sabiex il-ħin ta' ritenzjoni aġġustat t 'r (i) tas-sustanza i li trid tiġi ttestjata jkun eżattament bejniethom, jiġifieri, t 'r (N).
L-indiċi ta' żamma jista' jiġi kkalkulat kif ġej.
4. Fattur tal-kapaċità (k)
Fl-ekwilibriju, il-proporzjon tal-massa ta 'komponent fil-fażi (i) wieqfa mal-fażi mobbli (m), imsejjaħ il-fattur tal-kapaċità.Il-formula hija kif ġej:
5、Partition koeffiċjent (K) Fl-ekwilibriju, il-proporzjon tal-konċentrazzjoni ta ' komponent fil-fażi stazzjonarja (s) għall-fażi mobbli (m), imsejħa koeffiċjent ta ' partizzjoni.Il-formula hija kif ġej
Ir-relazzjoni bejn K u k:
Hija tirrifletti t-tip ta 'kolonna u l-għoqda tiegħu proprjetajiet importanti ta' struttura
sommarju qasir
Relazzjoni bejn il-valur taż-żamma u l-fattur tal-kapaċità u l-koeffiċjent tal-qsim:
Is-separazzjoni kromatografika hija bbażata fuq id-differenza fl-abbiltà ta 'assorbiment jew ta' xoljiment ta' kull komponent f'kampjun relattiv fiss, li jista 'jiġi espress kwantitattivament bid-daqs tal-valur tal-koeffiċjent tal-qsim K (jew fattur tal-kapaċità k).
Il-komponenti b'kapaċità qawwija ta 'assorbiment jew ta' xoljiment għandhom koeffiċjent ta' diviżorju kbir (jew fattur ta 'kapaċità) u ħin twil ta' żamma.Bil-maqlub, il-komponenti b'assorbiment jew solubilità dgħajfa għandhom koeffiċjent ta 'qsim żgħir u ħin qasir ta' żamma.
Teorija bażika tal-kromatografija
1. Teorija tat-trej
(1) Tressaq -- teorija termodinamika
Beda bil-mudell tal-pjanċa tat-torri propost minn Martin u Synge.
Kolonna ta 'frazzjonament: fit-trej għal diversi drabi ta' ekwilibriju gass-likwidu, skond il-punt tat-togħlija tas-separazzjoni differenti.
Kolonna: Il-komponenti huma bbilanċjati minn diviżorji multipli bejn iż-żewġ fażijiet u separati skont koeffiċjenti ta 'qsim differenti.
(2) Ipotesi
(1) Hemm ħafna trejs fil-kolonna, u l-komponenti jistgħu jilħqu malajr l-ekwilibriju tad-distribuzzjoni fl-intervall tat-trej (jiġifieri, l-għoli tat-trej).
(2) Il-fażi mobbli tidħol fil-kolonna, mhux kontinwament iżda pulsating, jiġifieri, kull passaġġ huwa volum tal-kolonna.
(3) Meta l-kampjun ġie miżjud ma 'kull pjanċa tal-kolonna, it-tixrid tal-kampjun tul l-assi tal-kolonna jista' jiġi traskurat.
(4) Il-koeffiċjent tal-qsim huwa ugwali fuq it-trejs kollha, indipendenti mill-ammont ta 'komponenti.Jiġifieri, il-koeffiċjent tal-qsim huwa kostanti fuq kull taban.
(3) Prinċipju
Dijagramma skematika tat-teorija tat-trej
Jekk komponent ta 'massa ta' unità, jiġifieri m=1 (per eżempju, 1mg jew 1μg), jiġi miżjud mat-trej Nru 0, u wara l-ekwilibriju tad-distribuzzjoni, minħabba li k=1, jiġifieri ns=nm, nm=ns=0.5.
Meta volum tal-pjanċa (lΔV) ta 'gass trasportatur jidħol fil-pjanċa 0 fil-forma ta' pulsazzjoni, il-gass trasportatur li fih il-komponent nm fil-fażi tal-gass jiġi mbuttat lejn il-pjanċa 1. F'dan iż-żmien, il-komponent ns fil-fażi likwida tal-pjanċa 0 u l-komponent nm fil-fażi tal-gass tal-pjanċa 1 se jiġi mqassam mill-ġdid bejn iż-żewġ fażijiet.Għalhekk, l-ammont totali ta 'komponenti li jinsabu fil-pjanċa 0 huwa 0.5, li fih il-fażijiet tal-gass u likwidi huma kull wieħed 0.25, u l-ammont totali li jinsab fil-pjanċa 1 huwa wkoll 0.5.Il-fażijiet tal-gass u likwidi kienu wkoll 0.25.
Dan il-proċess jiġi ripetut kull darba li gass trasportatur tal-volum tal-pjanċa ġdid jiġi pulsat fil-kolonna (ara t-tabella hawn taħt).
(4)Ekwazzjoni tal-kurva tal-ħruġ kromatografiku
σ hija d-devjazzjoni standard, hija l-ħin taż-żamma, C hija l-konċentrazzjoni fi kwalunkwe ħin,
C, hija l-konċentrazzjoni tal-injezzjoni, jiġifieri, l-ammont totali ta 'komponenti (żona tal-quċċata A).
(5) parametri tal-effiċjenza tal-kolonna
F'tR kostanti, l-iżgħar W jew w 1/2 (jiġifieri, il-quċċata idjaq), akbar in-numru ta 'pjanċi teoretiċi n, iżgħar l-għoli tal-pjanċa teoretika, u ogħla tkun l-effiċjenza tas-separazzjoni tal-kolonna.L-istess jgħodd għat-teorija effettiva tat-trej neff.Għalhekk, in-numru teoretiku ta 'trejs huwa indiċi biex tevalwa l-effiċjenza tal-kolonni.
(5)Karatteristiċi u nuqqasijiet
> Vantaġġi
It-teorija tat-trej hija semi-empirika u tispjega l-forma tal-kurva tal-ħruġ
Il-proċessi ta 'qsim u separazzjoni tal-komponenti huma illustrati
Huwa propost indiċi biex tiġi evalwata l-effiċjenza tal-kolonna
> Limitazzjonijiet
Il-komponenti ma jistgħux verament jilħqu l-ekwilibriju tad-distribuzzjoni fiż-żewġ fażijiet:
It-tixrid lonġitudinali tal-komponenti fil-kolonna ma jistax jiġi injorat:
L-influwenza ta 'diversi fatturi kinetiċi fuq il-proċess tat-trasferiment tal-massa ma kinitx ikkunsidrata.
Ir-relazzjoni bejn l-effett tal-kolonna u l-veloċità tal-fluss tal-fażi mobbli ma tistax tiġi spjegata:
Mhuwiex ċar liema fatturi ewlenin jaffettwaw l-effett tal-kolonna
Dawn il-problemi huma solvuti b'mod sodisfaċenti fit-teorija tar-rata.
2. Teorija tar-rata
Fl-1956, l-istudjuż Olandiż VanDeemter et al.assorbit il-kunċett tat-teorija tat-trej, u għaqqad il-fatturi kinetiċi li jaffettwaw l-għoli tat-trej, ressaq it-teorija kinetika tal-proċess kromatografiku - teorija tar-rata, u dderiva l-ekwazzjoni VanDeemter.Jikkunsidra l-proċess kromatografiku bħala proċess dinamiku mhux ta' ekwilibriju u jistudja l-influwenza tal-fatturi kinetiċi fuq it-twessigħ massimu (jiġifieri, l-effett tal-kolonna).
Aktar tard, Giddings u Snyder et al.ippropona l-ekwazzjoni tar-rata tal-kromatografija likwida (jiġifieri l-ekwazzjoni ta 'Giddings) ibbażata fuq l-ekwazzjoni ta' VanDeemter (aktar tard imsejħa l-ekwazzjoni tar-rata tal-kromatografija tal-gass) u skont id-differenza tal-proprjetà bejn il-likwidu u l-gass.
(1) Ekwazzjoni ta' Van Deemter
Fejn: H: huwa l-għoli tal-bord
A: koeffiċjent tat-terminu tad-diffużjoni eddy
B: koeffiċjent tat-terminu tad-diffużjoni molekulari
C: koeffiċjent tat-terminu tar-reżistenza tat-trasferiment tal-massa
(2) Ekwazzjoni ta' Giddings
Analiżi kwantitattiva u kwalitattiva
(1) Analiżi kwalitattiva
L-analiżi kromatografika kwalitattiva għandha tiddetermina l-komposti rappreżentati minn kull quċċata kromatografika.Peress li sustanzi varji għandhom valuri ta 'żamma definiti taħt ċerti kundizzjonijiet kromatografiċi, il-valur ta' żamma jista 'jintuża bħala indiċi kwalitattiv.Diversi metodi kwalitattivi kromatografiċi bħalissa huma bbażati fuq valuri ta 'żamma.
Madankollu, sustanzi differenti jista' jkollhom valuri ta' żamma simili jew identiċi taħt l-istess kundizzjonijiet kromatografiċi, jiġifieri, il-valuri ta' żamma mhumiex esklussivi.Għalhekk huwa diffiċli li jiġi kkaratterizzat kampjun kompletament mhux magħruf ibbażat fuq valuri ta 'żamma biss.Jekk fuq il-bażi tal-fehim tas-sors, in-natura u l-iskop tal-kampjun, jista 'jsir ġudizzju preliminari tal-kompożizzjoni tal-kampjun, u l-metodi li ġejjin jistgħu jintużaw biex jiddeterminaw il-kompost rappreżentat mill-quċċata kromatografika.
1. Kontroll kwalitattiv bl-użu ta 'sustanzi puri
Taħt ċerti kundizzjonijiet kromatografiċi, mhux magħruf għandu biss ħin ta' żamma definit.Għalhekk, dak mhux magħruf jista' jiġi identifikat kwalitattivament billi jitqabbel il-ħin ta 'ritenzjoni tas-sustanza pura magħrufa taħt l-istess kundizzjonijiet kromatografiċi mal-ħin ta' ritenzjoni tas-sustanza mhux magħrufa.Jekk it-tnejn huma l-istess, is-sustanza mhux magħrufa tista' tkun sustanza pura magħrufa;Inkella, dak mhux magħruf mhuwiex is-sustanza pura.
Il-metodu tal-kontroll tas-sustanza pura huwa applikabbli biss għas-sustanza mhux magħrufa li l-kompożizzjoni tagħha kienet magħrufa, li l-kompożizzjoni tagħha hija relattivament sempliċi, u li s-sustanza pura tagħha hija magħrufa.
2. Metodu tal-valur ta 'ritenzjoni relattiv
Il-valur relattiv ta' żamma α, jirreferi għall-aġġustament bejn il-komponent i u l-materjali ta' referenza Proporzjon tal-valuri ta' żamma:
Tinbidel biss bil-bidla tat-temperatura tal-fissattiv u tal-kolonna, u m'għandha x'taqsam xejn ma 'kundizzjonijiet operattivi oħra.
F'ċerta fażi stazzjonarja u temperatura tal-kolonna, il-valuri ta 'żamma aġġustati tal-komponent i u s-sustanza ta' referenza s huma mkejla rispettivament, u mbagħad ikkalkulati skond il-formula ta 'hawn fuq.Il-valuri relattivi ta' żamma miksuba jistgħu jitqabblu b'mod kwalitattiv mal-valuri korrispondenti fil-letteratura.
3, li żżid sustanzi magħrufa biex iżidu l-metodu tal-għoli tal-quċċata
Meta jkun hemm ħafna komponenti fil-kampjun mhux magħruf, il-qċaċet kromatografiċi miksuba huma densi wisq biex jiġu identifikati faċilment bil-metodu ta 'hawn fuq, jew meta l-kampjun mhux magħruf jintuża biss għall-analiżi tal-oġġett speċifikat.
"L-ewwel issir kromatogramma ta' kampjun mhux magħruf, u mbagħad tinkiseb kromatogramma oħra billi żżid sustanza magħrufa mal-kampjun mhux magħruf."Komponenti b'għoli tal-quċċata miżjuda jistgħu jkunu magħrufa għal sustanzi bħal dawn.
4. Żomm il-metodu kwalitattiv tal-indiċi
L-indiċi ta' ritenzjoni jirrappreżenta l-imġiba ta' ritenzjoni ta' sustanzi fuq il-fissattivi u bħalissa huwa l-indiċi kwalitattiv l-aktar użat u rikonoxxut internazzjonalment fil-GC.Għandu l-vantaġġi ta 'riproduċibbiltà tajba, standard uniformi u koeffiċjent żgħir tat-temperatura.
L-indiċi ta 'żamma huwa relatat biss mal-proprjetajiet tal-fażi stazzjonarja u t-temperatura tal-kolonna, iżda mhux ma' kundizzjonijiet sperimentali oħra.L-eżattezza u r-riproduċibilità tagħha huma eċċellenti.Sakemm it-temperatura tal-kolonna tkun l-istess bħal dik tal-fażi stazzjonarja, il-valur tal-letteratura jista 'jiġi applikat għall-identifikazzjoni, u mhux meħtieġ li jintuża l-materjal pur għal tqabbil.
(2)Analiżi kwantitattiva
Bażi għall-kwantifikazzjoni kromatografika:
Il-kompitu tal-analiżi kwantitattiva huwa li ssib il-mitt tal-komponenti fil-kampjun imħallat
Kontenut frazzjonali.Il-kwantifikazzjoni kromatografika kienet ibbażata fuq dan li ġej: meta l-kundizzjonijiet operattivi kienu konsistenti, kien
Il-massa (jew il-konċentrazzjoni) tal-komponent imkejjel hija determinata mis-sinjal tar-rispons mogħti mid-ditekter
Huwa proporzjonali.Jiġifieri:
Bażi għall-kwantifikazzjoni kromatografika:
Il-kompitu tal-analiżi kwantitattiva huwa li ssib il-mitt tal-komponenti fil-kampjun imħallat
Kontenut frazzjonali.Il-kwantifikazzjoni kromatografika kienet ibbażata fuq dan li ġej: meta l-kundizzjonijiet operattivi kienu konsistenti, kien
Il-massa (jew il-konċentrazzjoni) tal-komponent imkejjel hija determinata mis-sinjal tar-rispons mogħti mid-ditekter
Huwa proporzjonali.Jiġifieri:
1. Metodu ta 'kejl taż-żona tal-quċċata
L-erja tal-quċċata hija d-dejta kwantitattiva bażika pprovduta mill-kromatogrammi, u l-eżattezza tal-kejl taż-żona tal-quċċata taffettwa direttament ir-riżultati kwantitattivi.Intużaw metodi ta' kejl differenti għal qċaċet kromatografiċi b'forom ta' qċaċet differenti.
Huwa diffiċli li ssib il-valur eżatt tax-xitwa f'analiżi kwantitattiva:
Min-naħa waħda minħabba d-diffikultà li jitkejjel b'mod preċiż il-volum ta 'injezzjoni assolut: min-naħa l-oħra
L-erja tal-quċċata hija dipendenti fuq il-kundizzjonijiet kromatografiċi, u l-istrixxa kromatografika għandha tinżamm meta jitkejjel il-valur
La huwa possibbli u lanqas konvenjenti li tagħmel l-istess ħaġa.U anki jekk inti tista 'tikseb id-dritt
Il-valur eżatt, ukoll minħabba li m'hemm l-ebda standard unifikat u ma jistax jiġi applikat direttament.
2.Fattur ta 'korrezzjoni kwantitattiva
Definizzjoni ta' fattur ta' korrezzjoni kwantitattiva: ammont ta' komponenti li jidħlu fid-ditekter (m)
Il-proporzjon taż-żona tal-quċċata kromatografika tiegħu (A) jew tal-għoli tal-quċċata () huwa kostanti tal-proporzjonalità (,
Il-kostanti tal-proporzjonalità tissejjaħ il-fattur ta 'korrezzjoni assoluta għall-komponent.
Huwa diffiċli li ssib il-valur eżatt tax-xitwa f'analiżi kwantitattiva:
Min-naħa waħda minħabba d-diffikultà li jitkejjel b'mod preċiż il-volum ta 'injezzjoni assolut: min-naħa l-oħra
L-erja tal-quċċata hija dipendenti fuq il-kundizzjonijiet kromatografiċi, u l-istrixxa kromatografika għandha tinżamm meta jitkejjel il-valur
La huwa possibbli u lanqas konvenjenti li tagħmel l-istess ħaġa.U anki jekk inti tista 'tikseb id-dritt
Il-valur eżatt, ukoll minħabba li m'hemm l-ebda standard unifikat u ma jistax jiġi applikat direttament.
Jiġifieri, il-fattur ta' korrezzjoni relattiv “ta' komponent huwa l-komponent u l-materjal ta' referenza s
Il-proporzjon tal-fatturi ta 'korrezzjoni assoluta.
Wieħed jista 'jara li l-fattur ta' korrezzjoni relattiva huwa meta l-kwalità tal-komponent kontra l-istandard.
Meta s-sustanza s tkun ugwali, l-erja tal-quċċata tal-materjal ta 'referenza hija l-erja tal-quċċata tal-komponent
Multipli.Jekk xi komponent għandu massa m u l-ogħla żona A, allura n-numru ta 'f'A
Il-valuri huma ugwali għall-ogħla erja tal-materjal ta' referenza b'massa ta'.Fi kliem ieħor,
Permezz tal-fattur ta 'korrezzjoni relattiva, iż-żoni tal-quċċata ta' kull komponent jistgħu jiġu separati
Ikkonvertit għaż-żona tal-quċċata tal-materjal ta 'referenza ugwali għall-massa tiegħu, imbagħad il-proporzjon
L-istandard huwa unifikat.Allura dan huwa l-metodu normalizzat biex insemmu l-persentaġġ ta 'kull komponent
Il-bażi tal-kwantità.
Metodu ta 'ksib ta' fattur ta 'korrezzjoni relattiva: valuri ta' fattur ta 'korrezzjoni relattiva tqabblu biss ma' being
Il-kejl huwa relatat mal-istandard u t-tip ta 'ditekter, iżda mal-istrixxa tal-operazzjoni
Ma jimpurtax.Għalhekk, il-valuri jistgħu jiġu rkuprati minn referenzi fil-letteratura.Jekk it-test
Jekk ma tistax issib il-valur mixtieq fl-offerta, tista 'wkoll tiddeterminah lilek innifsek.Metodu ta' determinazzjoni
Metodu: Ċertu ammont tas-sustanza mkejla għaxar materjal ta 'referenza magħżul → magħmul f'ċerta konċentrazzjoni
Ġew imkejla l-ogħla żoni kromatografiċi A u As taż-żewġ komponenti.
Dik hija l-formula.
3. Metodu ta 'kalkolu kwantitattiv
(1) Metodu ta 'normalizzazzjoni taż-żona
Is-somma tal-kontenut tal-frazzjonijiet kollha mingħajr peak ġiet ikkalkulata bħala 100% għall-kwantifikazzjoni
Il-metodu jissejjaħ normalizzazzjoni.Il-formula tal-kalkolu tagħha hija kif ġej:
Fejn P,% huwa l-kontenut perċentwali tal-komponenti ttestjati;A1, A2... A n huwa komponent 1.L-erja tal-quċċata ta '1 ~ n;f'1, f'2... f'n huwa l-fattur ta' korrezzjoni relattiv għall-komponenti 1 sa n.
(2) metodu standard estern
Il-metodu ta 'tqabbil kwantitattiv bejn is-sinjal tar-rispons tal-komponent li għandu jiġi ttestjat fil-kampjun u l-komponent pur li għandu jiġi ttestjat bħala l-kontroll.
(3) Metodu standard intern
L-hekk imsejjaħ metodu standard intern huwa metodu li fih ċertu ammont ta 'sustanza pura huwa miżjud mas-soluzzjoni standard tas-sustanza ttestjata u s-soluzzjoni tal-kampjun bħala standard intern, u mbagħad analizzat u determinat.
(3)metodu ta ' żieda standard
Il-metodu ta 'żieda standard, magħruf ukoll bħala l-metodu ta' żieda interna, huwa li żżid ċertu ammont ta '(△C)
Ir-referenza tas-sustanza tat-test ġiet miżjuda mas-soluzzjoni tal-kampjun li għandha tiġi ttestjata, u t-test ġie miżjud mal-assaġġ
Il-quċċata tas-soluzzjoni tal-kampjun wara s-sustanza kienet ogħla minn dik tas-soluzzjoni tal-kampjun oriġinali
L-inkrement taż-żona (△A) intuża biex tiġi kkalkulata l-konċentrazzjoni tas-sustanza fis-soluzzjoni tal-kampjun
Kontenut (Cx)
Fejn Ax hija l-ogħla erja tas-sustanza li għandha titkejjel fil-kampjun oriġinali.
Ħin tal-post: Mar-27-2023